標(biāo)本要求：

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

產(chǎn)品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

2. 高速離心機(jī)

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。

2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實驗前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

操作步驟：

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)試劑盒發(fā)次硝鉍 AR,99.5%1H-咪唑-4- 98%

繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)試劑盒沙甙元硝鉍 CP,99.0%三氟磺酐 98%

β素(BTC) 試劑盒五味子脂素 M2次碳鉍 AR,90.0%3-溴 98%

β素(BTC) 試劑盒五乙兒茶素酯化鈣,二水 AR苯并-15-冠-5 98%

胎球蛋白A(FETU-A)試劑盒五乙紫丁香甙酯無水化鈣 AR,96.0%鄰苯二酚-O，O′-二乙 97%

胎球蛋白A(FETU-A)試劑盒西米杜鵑無水化鈣 CP,96.0%1-(3-氨)吡咯烷 97%

胎盤核糖核抑止劑(HPRI)試劑盒 西米杜鵑無水化鈣 ACS2-苯氧溴乙烷 98%

胎盤核糖核抑止劑(HPRI)試劑盒 喜果無水化鈣 99.99% metals basis代異丁烷 98%

胎盤蛋白(PP)試劑盒 松馳素D檸檬,一水 99.995% metals basis代正烷 99%

胎盤蛋白(PP)試劑盒 細(xì)葉桉萜酯 A尼泊金乙酯 AR,99%代正烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8% (GC)

胎盤催乳素(HPL)試劑盒 仙鶴草內(nèi)酯硫亞鐵，七水 AR代仲丁烷 99%

胎盤催乳素(HPL)試劑盒 仙鶴草內(nèi)酯-6-O-葡萄糖甙硫亞鐵，七水 99.99% metals basis1-代正戊烷  Standard for GC, ≥99.5% (GC)

胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 腺華素硫亞鐵，七水 ACS, ≥99.0%1-代正戊烷 99%

胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 香橙素，香樹素硫亞鐵，七水 for plant cell culture, ≥99%環(huán)戊乙 98%

抗巨病抗體IgM(anti-CMV IgM)試劑盒 小構(gòu)樹 B檸檬 CP,99.0%1,4-二丁烷 98%

抗巨病抗體IgM(anti-CMV IgM)試劑盒 小葉九里香內(nèi)酯 醫(yī)用級，紅色2-羥-4-氧苯 98%
IHH印度刺猬因子ELISA試劑盒細(xì)胞中的細(xì)胞核是由性物質(zhì)組成，它與堿性染料的親和力較強(qiáng)；而細(xì)胞漿則相反，它含有堿性物質(zhì)和性染料的親和力較大。巴氏染色液利用這一特性對細(xì)胞進(jìn)行多色性染色，細(xì)胞經(jīng)染色后能清晰地顯示細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，胞質(zhì)透亮鮮麗，各種顆粒分明，細(xì)胞核染色質(zhì)非常清楚，從而較容易發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。通過巴氏染色可反映出細(xì)胞在炎癥刺激下和癌變后的形態(tài)學(xué)變化，對早期發(fā)現(xiàn)和診斷一些病變和腫瘤具有較重要意義。

巴氏染色法是臨床細(xì)胞學(xué)檢查常用的傳統(tǒng)染色方法，在婦科檢查中，巴氏染色細(xì)胞學(xué)檢查是宮頸癌及癌前病變的較常用篩查方法。同時巴氏染色還可觀察女性激素水平和檢測生殖道病原體如念珠菌、滴蟲等的感染。其中EA50染液為EA36的改良型，其操作方法與EA36相同。一般認(rèn)為，EA36和EA50較適用于婦科標(biāo)本，改良EA65染液較常用于非婦科標(biāo)本(如胸、腹水等脫落細(xì)胞)。

儲存條件：室溫密封保存。

有效期：六個月。